pcr退火温度一般为多少?

PCR退火温度通常在50到65摄氏度之间，具体取决于引物的长度和GC含量。引物越长，GC含量越高，退火温度也相应提高。比如，20个碱基的引物，GC含量50%时，退火温度约55摄氏度；GC含量60%时，可能需要60摄氏度。

实际实验中，常用梯度PCR测试最佳温度，确保引物与模板精准结合。退火温度过高会导致扩增效率低，过低则可能引起非特异性结合。一般建议从55摄氏度开始优化，逐步调整找到最适条件。